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ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是...

材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4％的溶液備用。（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：枸櫞酸鈉（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml...

在體外進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測時，首先必須進(jìn)行淋巴細(xì)胞的分離。分離淋巴細(xì)胞的方法很多，但不管采用哪種方法，均要求分離的淋巴細(xì)胞純度高、產(chǎn)量多，而且不喪失活性，同時也要求分離技術(shù)簡單、操作方便。外周血液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的比例在幾百甚至上千比一，兩類細(xì)胞的大小和密度不同，其沉降速度也就不同。紅細(xì)胞的自然沉降率較快，加入高分子量的聚合物，如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結(jié)合，可以將淋巴細(xì)胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細(xì)胞一般包括單核細(xì)胞。除去單...

一、原理ELI-SPOT，即斑點ELISA，是利用酶標(biāo)板作反應(yīng)容器進(jìn)行的酶聯(lián)免疫反應(yīng)。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應(yīng)板，封閉后，依次加入待檢標(biāo)本、生物素化檢測抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物，陽性結(jié)果出現(xiàn)斑點顯色，利用倒置顯微鏡進(jìn)行斑點計數(shù)。其優(yōu)勢在于可在與體內(nèi)（活體條件）極接近的條件下，在體外對細(xì)胞分泌成分（如細(xì)胞因子、Fas等）進(jìn)行追蹤研究。幾點說明：l反應(yīng)板：ELI-SPOT所用的反應(yīng)板可以是PVDF膜包被好的，也可以是普通酶標(biāo)板。如用普通...

細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動態(tài)分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針，可對細(xì)胞內(nèi)鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標(biāo)記并對它們進(jìn)行比率值和濃度梯度變化測定。由于細(xì)胞內(nèi)鈣離子為傳遞信息的第二信使，對細(xì)胞生長分化起著重要作用，通過單標(biāo)記或雙標(biāo)記對細(xì)胞內(nèi)鈣離子和其它離子的熒光強(qiáng)度和分布測定，測定樣品達(dá)到毫秒級的快速變化。借助光學(xué)切片功能可以測量樣品深層的熒光分布以及細(xì)胞光學(xué)切片的生物化學(xué)特性的變化。通過不同時間段的檢測可...

Synonyms:ApolipoproteinE2Description:ApoEbelongstoagroupofproteinsthatbindreversiblywithlipoproteinａndplayanimportantroleinlipidmetabolism.Inadditiontofacilitatingsolublizationoflipids,theseproteinshelptomaintainthestructuralintegrityoflipo...

脂聯(lián)素的概念A(yù)diponectin（脂聯(lián)素）是脂肪細(xì)胞分泌的一種內(nèi)源性生物活性多肽或蛋白質(zhì).人體內(nèi)的Adiponectin（脂聯(lián)素）由244個氨基酸組成,分子量為30KD.Adiponectin（脂聯(lián)素作為一種胰島素增敏激素（AnInsulin-sensitizingHormone）,可以增加促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞的脂肪酸氧化和糖吸收,明顯加強(qiáng)胰島素的糖元異生作用,抑制肝臟的糖生成,是機(jī)體的脂質(zhì)代謝和血糖穩(wěn)態(tài)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子.日本學(xué)者近來證明Adiponectin（脂聯(lián)素）...

人腫瘤壞死因子酶聯(lián)免疫法定量檢測試劑盒HumanTNF-aELISAKit產(chǎn)品描述：腫瘤壞死因子（TNF）是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，主要由激活的單核-巨噬細(xì)胞所分泌，參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng)，也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下，當(dāng)患有某些疾病時，TNF水平可有不同程度增高。因此，檢測患者體液中的TNF水平，具有一定的臨床意義。本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF，包被抗體及檢測抗體采...

血漿脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在2型糖尿病中的作用及相關(guān)性柳江燕，陳雪紅，胡金貴，王正江，馬冬梅，魯秀娟柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；陳雪紅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；胡金貴730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；王正江730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；馬冬梅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；魯秀娟730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科通訊作者：柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科【摘要】目的探討血漿脂聯(lián)素（adiponectin）和腫瘤壞死因...

甲基強(qiáng)的松龍對嗅鞘細(xì)胞移植治療受損視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的早期保護(hù)效應(yīng)裴群羽，許媛媛，王珂，楊立元，楊磊，雷季良北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室，北京市100083裴群羽★，女，1980年生，黑龍江省哈爾濱市人，漢族，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部在讀碩士，主要從事中樞神經(jīng)再生方面研究。Hxz800829通訊作者：雷季良,副教授，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室，北京市100083leijiliang中圖分類號:R617文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1673-8225（2007）29-05701-04收稿日期：20...

國外醫(yī)學(xué)計劃生育分冊2000年2月第19卷第1期重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科（400046）審校摘要胚胎著床過程的調(diào)節(jié)十分復(fù)雜，近年來細(xì)胞生長因子參與胚胎發(fā)育和著床的功能研究十分熱門，在細(xì)胞生長因子發(fā)揮作用的網(wǎng)絡(luò)中，表皮生長因子起著舉足輕重的作用，是著床過程順利完成*的因子之一。本文就表皮生長因子改善胚胎發(fā)育、啟動胚胎著床、調(diào)節(jié)植入過程等內(nèi)容進(jìn)行簡要綜述。關(guān)鍵詞：表皮生長因子胚胎發(fā)育著床自1962年Cohen從雄鼠頜下腺分離提純出表皮生長因子（epidermalgrowth...

的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。4.1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)...